柱效損失的可能原因
1.額外的峰展寬。要保證管路的長度和內(nèi)徑都保持zui小。
2.洗脫的平衡時間不夠。
3.不正確的洗脫液pH或洗脫液的離子強度。
4.洗脫液中存在不正確離子。
5.固定相污染。
a.高柱壓伴隨分辨率降低。
1.顆粒物積聚在燒結(jié)物或者填充物床上。
(a)樣品來源---過濾或離心
(b)洗脫液來源---過濾洗脫液,封閉洗脫液容器。
(c)系統(tǒng)來源---沖洗整個系統(tǒng)管路和泵;安裝在線系統(tǒng)過濾器。
2.蛋白質(zhì)類物質(zhì)的積聚
(a)微生物在樣品中生長。
3.微生物在洗脫液中生長。
b.正常柱壓伴隨柱效降低
1.有機污染
(a)樣品中有脂肪,油脂,脂質(zhì)。固定相的表面被覆蓋。
(b)從樣品中帶來的不確切的有機物或未正確制備的洗脫液。
(c)在洗脫液制備完成以后帶入洗脫液中的非特定有機物,例如在運輸時從大氣中帶來。